IZON Science 胞外體提取和粒子分析的技術整合平台

Integrated Platform for EV Analysis

SEC (qEV Columns 胞外體提取管柱) + AFC (自動提取機) + TRPS (qNano Gold 奈米粒徑/濃度/界達電位分析儀)

胞外體 (Exosome/EVs) 是具有一系列重要生物功能的膜性介質物並為目前熱門的研究主題。使用超速離心法 (UC) 和化學沉澱試劑 (PEG Reagent Kits) 法來提取胞外體會遇到許多問題, 例如結果的顯示不一致、形成汙染物和聚合物沉澱等缺點。

胞外體微小的體積和異質性還暴露了包含共軛焦顯微鏡 (confocal microscope)、流式細胞技術 (flow cytometry)、動態光散射 (DLS)、奈米粒子追蹤 (NTA) 和電子顯微鏡 (EM) 等大多數分析技術的限制。

在此我們介紹 IZON Science 完整專業的胞外體(細胞外囊泡)整合平台此平台將使胞外體的研究取得突破性的進展。

IZON 整合了尺寸排阻色譜法 (Size Exclusion Chromatography, SEC)、自動提取裝置 (AFC) 和可調式電阻脈衝感應技術 (Tunable Resistive Pulse Sensing, TRPS), 可完整、簡單、快速、高精度的提取和分析胞外體粒子。

qEV Columns 胞外體提取管柱使用 SEC 尺寸排阻色譜法

qNano Gold 奈米粒徑/濃度/界達電位分析儀使用 TRPS 可調電阻脈衝感應

全面的 Exosome/EVs 胞外體(細胞外囊泡)分析整合方案: SEC + AFC + TRPS

SEC

qEV Columns 胞外體提取管柱

SEC 管柱已被證實其有關於"零蛋白質"的最高純度的 Exosome/EVs, 同時也是一個可保留胞外體完整性的提取方式。 採用自然滴落, 過程簡單、快速、有效也是提供標準的胞外體代表集合的唯一方法。qEV columns 胞外體提取管柱已有 35nm & 70nm 兩種尺寸可選擇, 樣品注入體積從 100µL ~ 100mL (洗脫後可重複使用), 可以手動或自動提取, 搭配 AFC 胞外體(細胞外囊泡)自動提取機更可消除人為作業的誤差風險。以上的系統也被許多研究人員視為臨床研究應用唯一可行的分離純化方法。

 

TRPS

qNano Gold 奈米粒徑/濃度/界達電位分析儀

TRPS 技術可提供 Particle-by-Particle 的粒徑分佈圖, 是一個功能完整且經由 NIST 校準品校正的奈米生物粒子分析方法, 精度達 1 nm 而最小尺寸為 40 nm ; 可同步提供正確的粒徑尺寸 v.s 數量濃度的分佈圖和每顆粒子個體的帶電性(Zeta Potential), 是Exosome/EVs 胞外體研究分析的必備工具

 

首先, qEV Columns + AFC 的胞外體提取過程大約需要15分鐘, 提取完成後再以 TRPS 技術進行分析大約需要40分鐘, 之後即可快速的進行資料分析並產生 PDF 報告, 全部的過程一般可於1 小時內完成。

腦脊髓液 (cerebral spinal fluid, CSF) 與血漿樣本的提取分析

CSF 與血漿樣本經由 qEVoriginal column 提取後的餾分 (Fractions) 以電解質溶液 (ex: PBS) 稀釋1:10後使用 TRPS 技術分析。從 qEV columns 沖提出 Fraction 7 ~ Fraction 9 CSF 和血漿的胞外體, 之後再以血漿的 Fraction 8 和 CSF 的 Fraction 9 做鑑定, 結果如左圖。

有些胞外體會在 Fraction 10 沖提出現, 但此餾分通常包含更多的污染性蛋白質所以通常捨棄不用。經由 TRPS 技術分析的粒徑和濃度的典型資料如左圖。

在某些胞外體濃度低的生物樣品時, qEV columns 在提取過程前後可能會額外需要使用包含旋轉過濾器 (spin filter) 在內的濃縮步驟。

 

Izon Science 整合的 SEC + AFC + TRPS 技術平台對於分析胞外體是一個非常有效的方法, 也是一種非平均值的方法, 非常適合有多重粒徑分佈性的樣品, 此平台亦是臨床研究應用的有效途徑。

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